Análisis de alimentos y forrajes · Capítulo 4 de 9

Liofilización

Secado de muestras frágiles por sublimación del agua: principio del método según el diagrama de fases, material necesario y procedimiento con el liofilizador.

Autoría: Pascal Leterme (I.A., Ph. D., profesor asociado) y Fernando Estrada (I.A., Esp., analista)

Contenido del capítulo

Caso de una muestra húmeda por liofilización

Generalmente, se reserva la desecación por liofilización para las muestras frágiles, como carne o leche y las muestras biológicas (contenidos intestinales, plasma, etc).

Como se trabaja en vacío, es preferible colocar una hoja de papel absorbente sobre el frasco, para impedir que el polvo entre en el aparato o, peor, en la bomba de vacío.

Se debe considerar la desecación por liofilización como una desecación a 60°C. Es decir que será necesario realizar, después, una determinación de la materia seca analítica.

La liofilización consiste en la desecación de material biológico por sublimación del agua (Figura 3)

El principio se divide en tres etapas:

  • Etapa 1: congelación de la muestra

  • Etapa 2: baja de presión hacia la línea de sublimación

  • Etapa 3: secado de la muestra por sublimación

Diagrama de fases del agua (presión frente a temperatura) con las fases sólida, líquida y vapor y tres flechas numeradas.
Figura 3. Principio de Liofilización basado en el diagrama de fases del agua

Material necesario

  • Liofilizador

  • Congelador

  • Balanza de precisión

  • Frascos de plástico

  • Hojas de papel absorbente, elásticos

Procedimiento

  1. Colocar una muestra de la materia a analizar en un frasco previamente tarado, pesar con una balanza de precisión (g) y anotar el peso.
  2. Congelar el frasco a – 18 °C durante al menos 24 h
  3. Encender el equipo de congelación del liofilizador y esperar hasta que alcanza al menos –55°C
  4. Colocar una hoja de papel sobre el frasco y colocarlo en la cámara en acrílico del liofilizador
  5. Cerrar la cámara con la tapa y encender la bomba de vacío y esperar la desecación completa de la muestra (según el volumen, se puede demorar de 7 a 10 días)
  6. Verificar que se obtiene el vacío
  7. Colocar aire líquido sobre la muestra antes de colocarla en el liofilizador
  8. Dejar entrar, con precaución, el aire en la cámara ANTES de apagar la bomba
  9. Apagar la bomba
  10. Apagar el equipo de congelación
  11. Pesar el frasco, anotar el peso y calcular la cantidad de materia seca
  12. Dejar descongelar el hielo y limpiar la cámara y el serpentín con papel